盡管抗體是科學(xué)研究中常用的一種工具，但是沒有準(zhǔn)確的科學(xué)架構(gòu)來驗(yàn)證抗體在不同研究方法上的特異性。據(jù)估計(jì)，在美國和全世界使用特征不明確的抗體每年分別浪費(fèi)3.5億和8億美元，而這樣的抗體會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或結(jié)果不可靠。IWGAV是為抗體生產(chǎn)商和使用者制定抗體驗(yàn)證策略的組織。

抗體驗(yàn)證工作組（IWGAV）是范圍內(nèi)由研究方向各異的蛋白質(zhì)生物學(xué)家組成的獨(dú)立工作組。IWGAV 9月19日在瑞典斯德哥爾摩披露，為滿足在抗體特異性、功能性和重復(fù)性的迫切需求，該工作組已于9月在《Nature Methods》在線發(fā)表了初步的戰(zhàn)略建議。“針對建立廣泛可接受的抗體驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)和為生物醫(yī)藥研究提供始終如一的高質(zhì)量抗體，這篇文章的發(fā)表預(yù)示邁出了重要的步。”瑞典斯德哥爾摩工學(xué)院的微生物學(xué)教授兼IWGAV主席Dr. Mathias Uhlén表示。

IWGAV確定了五個支柱策略，以指導(dǎo)通過特定應(yīng)用進(jìn)行抗體驗(yàn)證的方式：一是基因策略：利用CRISPR/Cas 或RNAi等技術(shù)，將對照細(xì)胞或組織中的目標(biāo)基因敲除或敲低，并檢測這些對照細(xì)胞或組織中的相關(guān)信號。二是正交策略：使用非抗體依賴方法對大量樣品進(jìn)行定量，并檢測基于抗體和非抗體定量間的相關(guān)性。三是獨(dú)立抗體策略：使用2種或多種可識別目標(biāo)蛋白表面不同抗原決定簇的獨(dú)立抗體，并通過對比或定量分析確定特異性。四是標(biāo)簽蛋白的表達(dá)：為內(nèi)源性目標(biāo)基因添加親和標(biāo)簽或熒光蛋白標(biāo)簽。利用抗體檢測方法可對來自標(biāo)簽蛋白的信號進(jìn)行校正。五是免疫捕獲及質(zhì)譜分析（MS）：免疫沈淀（IP）技術(shù)可通過使用與目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合的抗體分離出目標(biāo)蛋白，其與MS分析結(jié)合（IP-MS）可識別與純化抗體直接發(fā)生相互作用的目標(biāo)蛋白以及可能與目標(biāo)蛋白形成復(fù)合物的蛋白。

盡管上述每一項(xiàng)策略都能為抗體特異性提供證據(jù)，但I(xiàn)WGAV建議采取多項(xiàng)策略來闡明抗體在不同研究應(yīng)用中的特異性。發(fā)表在《Nature Methods》上的文章在抗體重復(fù)性上，還對生產(chǎn)商和用戶提出了建議。發(fā)表在《Nature Methods》上的提議旨在為抗體驗(yàn)證和重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)基礎(chǔ)，并鼓勵建立廣泛認(rèn)可的抗體綜合性使用指南。